Царь Петр не верит доносу Кочубея и выдает его Мазепе. Гетман подвергает Кочубея жестоким пыткам и приговаривает к казни. Мария, живущая во дворце Мазепы, ничего не знает о судьбе своего отца. В ночь перед казнью к ней проникает мать и открывает страшную правду. Они спешат на место казни, но прибывают слишком поздно.
